Über quantitative Bestimmung von Peptidbindungen. 15
Mit Bezug auf die Frage, wie lange das Kochen mit Salzsäure über freier Flamme dauern muß, um totale Hydrolyse zu erzeugen, erweist es sich, daß in denjenigen Fällen, wo das Ausgangsmaterial vorher stark hydrolysiert ist, ein sechsstündiges Kochen wohl stets genügen wird; handelt es sich dagegen um einen Stoff wie Witte-Pepton (Versuch Nr. 5), so muß man, um ganz sicher zu gehen, das Kochen mehr als ü Stunden lang fortsetzen — wie lange, das läßt sich nach den in der Tabelle angegebenen Zahlen nicht entscheiden.
Da es sich erwies, daß die vollständige Hydrolyse der Proteine ein wenigstens Ostündiges Kochen über freier Flamme mit HCl erforderte, versuchten wir, ob es nicht tunlich sei, die Hydrolyse auf andere Weise schneller zu vollführen; aus den unten angeführten Versuchen wird man sehen, daß l1'2 ständige Erhitzung der Proteine auf 150° mit Säure im Autoklaven in allen Fällen zum Ziele zu führen scheint. Wir wandten teils Schwefelsäure, teils Salzsäure in verschiedenen Konzentrationen an. Die Säuremenge ist in normaler Säure angegeben, und die von uns benutzten Säuremengen variierten zwischen 1- und 5-normal. Des Vergleiches wegen bestimmten wir gleichzeitig den Hydrolysegrad nach Kochen mit konzentrierter (20 °/oiger) HCl über freier Flamme 3, 6 und 12 Stunden hindurch.
Tabelle II.
Standardlösung — ca. 4°/oige Lösung von trockenem Hühnereiweiß.
; — —-----------------,----
A = Ammoniakstickstoff -f* Aminostiekstoff B = Ammoniakstickstoff G = Aminostiekstoff (A -r B)
Totalstickstoff in 5 ccm = 23,10 mg.
	A	B	V G
Bestimmung sogleich . . ... . , . . . ;	1.40	0,40	1,00
3 Stunden mit 20°/oiger Salzsäure gekocht, darauf eingedampft		• 16,00	1,70	£ 15,20
ö Stunden mit 20°/oiger Salzsäure gekocht, darauf eingedampft .........	17.50	1,85	15,65
12 Stunden mit 20°/oiger Salzsäure gekocht, darauf eingedampft		17,64	Y * V 2,00	Y 15,64