Uber quantitative Bestimmung von IVptidbindungen.	9
eine’ der Bedingungen für die Richtigkeit des Verfahrens die sein muß, daß man imstande ist, durch Eindampfen mit konzentrierter Salzsäure auf dem Wasserbade den vollständigen Abbau des Proteins und der Spaltungsprodukte desselben zu erzielen ; ist dies nicht der Fall — enthält der mit Salzsäure behandelte Stoff noch andere Peptidbindungen, die sich durch weitere Behandlung mit Säure lösen lassen —, so werden wir einen Fehler dadurch begehen, daß der supponierte «Nullpunkt-nicht richtig bestimmt worden ist.
Um dieses Verhalten näher zu untersuchen und um wonniglich ein Verfahren zur sicheren Bestimmung des Gehalts der Proteinstoße und ihrer Spaltungsprodukte an. peptidgebundenem Stickstoffe zu finden, haben wir eine Reihe von Untersuchungen angestellt, die wir hier näher erörtern werden.
Was das von uns- angewandte Verfahren betrifft, so wird folgendes Beispiel dasselbe leicht verständlich machen. Um die Menge peptidgebundenen Stickstoffes in Witte-Pepton zu untersuchen, gingen wir von einer ca. 4°/oigen Lösung aus, die nach der Kjeldahl-Analyse in 5 ccm einen Stickstoffgehalt von 57,25 mg zeigte.
25 ccm der Lösung verdünnten wir in einem Meßkolben bis auf 200 ccm, nachdem wir vorher mit Lackmuspapier möglichst, genau neutralisiert hatten: von dieser Lösung nahmen wir 40 ccm zur Formoltitrierung, während wir andere 40 ccm zur Ammoniakbestimmung , an wandten (die stets durch Destillation im Vakuum mit Baryt, in Methylalkohol gelöst, ausgeführt wurde). Die Formoltitrierung ergab 13,44 mg formoltitrierbaren Stickstoffes und die Ammoniakbestimmung 0,80 mg Stickstoff als Ammoniak;1) die Menge des Aminosäurestickstoffes wird mithin: 13.44 4- 0,80 = 12,64 mg.
25 ccm der ursprünglichen Peptonlösung brachten wir in eine Porzellanschale, wir setzten 25 ccm konzentrierte Salzsäure zu und dampften die Flüssigkeit bis zur Trockne ein, setzten von neuem Salzsäure zu und dampften wieder bis zur Trockne ein. Darauf brachten wir den Rest mit Hilfe von
*) Über das Verhalten des Ammoniaks siehe näheres unten.