Übrt Hemmung der Blausäurewirkung in lebenden Zellen. 343
Methode.
Der wesentlichste Unterschied gegen frühere Versuche4) bestand darin, daß die Suspension der Zellen weniger dicht war. Da trotzdem, um die Ausschläge nicht zu verkleinern, die gleiche Menge Zellen benutzt wurde, so war das Oesamtvolumen größer, etwa 10 ccm (gegen 3 ccm früher). Die Suspensionsflüssigkeit war eine 0,9'V'oige Natriumchloridlösung, der in ihr gelöste Sauerstoff kam, im Verhältnis zum Hämöglobin-sauerstoff, jetzt in Betracht. — Die Suspensionen wurden stets hei der Temperatur des Atmungsversuchs. 29°, an der Luft gesättigt. Nach einer passenden Versuchszeit, in der Regel 2 Stunden und bei den Versuchen mit »'loooo-n-KON nach 5 bis 6 Stunden, wurden sie unter 3 ccm NH.rSaponin2) geschichtet3) in Gläser von ca. 50 ccm. Hierauf wurde am Haldane-Barcroftschen Manometer1) die Druekverminderung bestimmt, die beim Schütteln bis zur Sättigung auftrat. In einer Probe, die nicht geatmet hat, sondern sofort nach der Sättigung mit Cyankali vergiftet und dann an dein Manometer gesättigt wird, tritt eine Druckverminderung auf, die herrührt von folgenden Faktoren: l. Sauerstoff und Stickstoff, die bei der Bestimmungslemperatur, ca. 15—19°, sich in der Flüssigkeit, die ja hei 29° gesättigt ist, lösen, werden physikalisch absorbiert: 2. das Hämoglobin bindet bei anderer Temperatur und in anderem Milieu (die Blutkörperchen werden durch das Saponin gelöst)
‘i 0. Warburg, Diese Zeitschrift, Bei. (19. S. füg: Bei. 70. S. 413: Bd. 71. S. 479.
*) 125 ccm C()2-freie »/lo-XaOH; 125 ccm Wasser: 0.7 g NH4C.l: 1.) g Saponin; 1 ccm 20°/oige alkohol. Lösung von Phenylurethan.
• ) Die 10 ccm fassenden Atmungsgläschen bähen auf der einen Seite einen eingeriebenen Glasstopfen, auf der andern Seite einen Hahn mit Kapillare; zum Unterschichten wird die Kapillare in das Beslimmungs-glas in NHs-Saponin gestellt und der Hahn langsam geöffnet, nachdem der Glasstopfen gelüftet ist.
4) Auf Hat vonBrodie besteht die Flüssigkeit im Manometer aus : ouOccm Wasser; 23 g NaCl; 5 g Natr. choleinic. Merck; etwas Thymol. Das Hezept verdanke ich Herrn Prof. Wolf aus New York.